饱和硫酸铵的配制方法和注意事项

摘 要:

在室温(25℃)条件下,配制饱和硫酸铵时,是在1000ml双蒸水中加入约780g硫酸铵。实际操作时,由于硫酸铵的溶解速度很慢,而且要配成饱和溶液,当硫酸铵的浓度高时,溶解速度更慢,因此在加入硫酸铵后,可以通过水浴等加热的方式促进硫酸铵的溶解,然后放置过夜,待晶体析出,即达100%饱和度的饱和硫酸铵溶液。

关键词:

硫酸铵在水中的溶解度,100°C时为1.034g/ml,25°C时为0.767g/ml,0°C时为0.706g/ml。实际操作时,由于硫酸铵的溶解速度很慢,而且要配成饱和溶液,当硫酸铵的浓度高时,溶解速度更慢,因此在加入硫酸铵后,可以通过水浴(80°C)等加热的方式促进硫酸铵的溶解,然后根据需要,在0°C或室温(25°C)放置过夜,待晶体析出,即达100%饱和度的饱和硫酸铵溶液。

一、配制方法:

1、1000ml双蒸水中加入约780g硫酸铵。

2、80°C水浴,促进硫酸铵的溶解,并不时振荡,确保硫酸铵溶解。

3、根据需要,将溶解后的硫酸铵溶液放置于0°C或室温(25°C)过夜。

4、如果第二天硫酸铵溶液中有晶体析出,即为达到100%饱和度的饱和硫酸铵溶液。

5、由于硫酸铵呈弱酸性,可以用氨水调节pH值至需要水平(如7.0或7.2),待用。

二、注意事项:

1、硫酸铵溶液降至室温后析出的结晶要留着,随着温度变化,溶解度也会变化,为了保证溶液始终是饱和的,应将结晶留在瓶底,使用时取上面的溶液即可。

2、饱和硫酸铵溶液的pH7.0或7.2影响不大,也有调到7.4的,因为最后沉淀的蛋白一般都是用PBS稀释的,硫酸铵的pH值对蛋白溶液影响不大。

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