含铁牛奶培养基的配制方法与产气荚膜梭菌汹涌发酵

摘 要:

产气荚膜梭菌是临床上气性坏疽病原菌中最多见的一种梭菌。含铁牛奶培养基(Iron Milk medium)主要用于产气荚膜梭菌的测定。产气荚膜梭菌具有显著发酵乳糖的能力。在牛奶培养液中,迅速分解乳糖产酸,使酪蛋白凝固,并产生大量气体将凝固的酪蛋白冲散,此种强烈发酵现象称“汹涌发酵”,往往在培养6小时即可出现,为本菌特点之一。

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产气荚膜梭菌是临床上气性坏疽病原菌中最多见的一种梭菌,因能分解肌肉和结缔组织中的糖,产生大量气体,导致组织严重气肿,继而影响血液供应,造成组织大面积坏死,加之本菌在体内能形成荚膜,故名产气夹膜梭菌。

一、含铁牛奶培养基使用原理

含铁牛奶培养基(Iron Milk medium)主要用于产气荚膜梭菌的测定 (GB/T 8538-2008) 。产气荚膜梭菌具有显著发酵乳糖的能力。在牛奶培养液中,迅速分解乳糖产酸,使酪蛋白凝固,并产生大量气体将凝固的酪蛋白冲散,此种强烈发酵现象称“汹涌发酵”,往往在培养6小时即可出现,为本菌特点之一。

含铁牛奶培养基的配制方法与产气荚膜梭菌汹涌发酵

二、含铁牛奶培养基配方(每升)

全脂奶粉:199g

硫酸亚铁:1g

三、含铁牛奶培养基使用方法

1、称取本培养基200g,加入50-60℃温水溶解,分装试管,每管10mL,115℃高压灭菌10min,灭菌后,快速冷却。本培养基必须新鲜配制。

2、取生长旺盛的FT培养液1mL接种于含铁牛奶培养基,46℃水浴培养5h。

3、观察是否有“暴烈发酵”现象。

四、含铁牛奶培养基质量控制

下列质控菌株接种后于46℃水浴培养5h结果如下:

菌 名       菌 号    培养特征

产气荚膜梭菌  ATCC13124   暴烈发酵

大肠埃希氏菌  ATCC25922   不发酵

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