结核分枝杆菌萋-尼氏抗酸染色方法

摘 要:

萋-尼氏抗酸染色是实验室检验最常用的染色方法之一,其染色液主要包括三种:苯酚复红染色液、3%盐酸酒精脱色液和骆氏美蓝染色液。染色方法:将被检材料涂片,经火焰固定。加苯酚复红染色液覆盖,热染5min。滴加3%盐酸酒精脱色30-60s。然后以骆氏美蓝染色液复染lmin。水洗,吸干,镜检。结核分枝杆菌类抗酸菌因不能被盐酸酒精脱色而染成红色,其他细菌与动物细胞可被盐酸酒精脱色而被染成蓝色。

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一、染色液配制方法

1、苯酚复红染色液

碱性复红饱和酒精溶液(每100mL 95%酒精加3g碱性复红)10mL,5%苯酚溶液90mL, 二者混合后用滤纸过滤。

2、3%盐酸酒精脱色液

浓盐酸3mL,95%酒精97mL,混匀。

3、骆氏美蓝染色液

甲液:美蓝0.3g,95%酒精30mL。

乙液:0.01%氢氧化钾溶液100 mL。

将甲乙两液混合。

二、萎-尼氏抗酸染色方法

1、将处理过的被检材料涂片,经火焰固定。

2、加苯酚复红染色液覆盖,将玻片在火焰上加热至出现蒸汽 (不能产生气泡),如此热染5min (如染色液干涸,须加适量补充)。

3、水洗,滴加3%盐酸酒精脱色30-60s (至无色素脱下为止)。

4、水洗,以骆氏美蓝染色液复染lmin。

5、水洗,吸干,镜检。

三、萎-尼氏抗酸染色结果

结核分枝杆菌类抗酸菌因不能被盐酸酒精脱色而染成红色,其他细菌与动物细胞可被盐酸酒精脱色而被染成蓝色。

参考资料:

动物结核病诊断技术(GB/T 18645-2002)

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