大肠杆菌-葡萄球菌穿梭质粒pMAD质粒图谱和序列

摘 要:

质粒pMAD是大肠杆菌和金黄色葡萄球菌、单核细胞李斯特氏菌、枯草芽孢杆菌等的穿梭质粒,质粒全长9666bp,含有革兰氏阳性菌的温敏型复制起始位点、氨苄青霉素和红霉素抗性基因、耐热β-半乳糖糖苷酶基因。在大肠杆菌,pMAD质粒呈多拷贝,氨苄青霉素抗性表型。在革兰氏阳性菌中,pMAD质粒呈温敏型复制起始,红霉素或林可霉素抗性表型。

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pMAD质粒是大肠杆菌和一些革兰氏阳性菌的穿梭质粒,包括金黄色葡萄球菌、单核细胞李斯特菌枯草芽孢杆菌等。pMAD质粒全长9666bp,含有革兰氏阳性菌的温度敏感型复制起始位点、氨苄青霉素抗性基因和红霉素抗性基因(erm),并含有一个耐热的β-半乳糖糖苷酶基因(bgaB)。

pMAD质粒图谱如下:

大肠杆菌-葡萄球菌穿梭质粒pMAD质粒图谱和序列

pMAD质粒序列可参考:http://subtiwiki.uni-goettingen.de/wiki/index.php/PMAD。

pMAD质粒可用于对一些革兰氏阳性菌的基因进行失活突变。在含X-Gal的平板上,可通过蓝白斑的方法快速筛选质粒丢失菌株。在大肠杆菌中,pMAD质粒呈多拷贝,氨苄青霉素抗性表型。在葡萄球菌等革兰氏阳性菌中,pMAD质粒呈温度敏感型复制起始,红霉素(erythromycin)或林可霉素(lincomycin)抗性表型。

参考文献:

Arnaud M, Chastanet A, Débarbouillé M. New vector for efficient allelic replacement in naturally nontransformable, low-GC-content, gram-positive bacteria. Appl Environ Microbiol, 2004, 70(11):6887-6891.

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