革兰氏染色法的原理

摘 要:

革兰氏染色法的原理与细菌细胞壁的结构和化学成分有关。革兰氏阴性菌的细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度松散。乙醇脱色时,能让结晶紫染料被洗脱,再经沙黄等复染而呈红色。革兰氏阳性菌细胞壁厚,细胞壁所含脂类少,肽聚糖多,肽聚糖网层次较多且交联致密。乙醇脱色时,保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上,从而被染成紫色。

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革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师、细菌学家汉斯·克里斯蒂安·约阿希姆·革兰氏(Hans Christian Joachim Gram,1853-1938)建立。

目前,革兰氏染色法的原理仍不太清楚,但一般认为与细菌细胞壁(cell wall)的结构和化学成分有关。

革兰氏阴性菌的细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度松散。当以95%乙醇脱色时,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,故能让结晶紫(或龙胆紫)与碘形成的紫色染料复合物被95%乙醇洗脱出细胞壁之外,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。

革兰氏阳性细菌细胞壁厚,细胞壁所含脂类少,肽聚糖多,肽聚糖网层次较多且交联致密,形成一种透性屏障。当用95%乙醇脱色时,肽聚糖脱水使孔隙缩小到不易让结晶紫(或龙胆紫)与碘形成的紫色染料复合物洗出细胞壁外,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上,从而被染成紫色。

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