几种主要微生物生理群最大或然数法(稀释培养计数法)计数表

摘 要:

最大或然数法(MPN)又称稀释培养计数法,适用于测定在一个混杂的微生物群落中不占优势,但具有特殊生理功能的类群。MPN法广泛应用于测土壤、水体等环境中的特殊微生物生理类群和藻类的数量,其缺点是只适于进行特殊生理类群的测定,结果较粗放,只有在因某种原因不能使用平板计数时才采用。表中列举了几种主要微生物生理群MPN计数法。

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最大或然数法(most probable number,MPN)又称稀释培养计数法。MPN法适用于测定在一个混杂的微生物群落中虽不占优势,但却具有特殊生理功能的类群,其特点是利用待测微生物的特殊生理功能的选择性来摆脱其他微生物类群的干扰,并通过该生理功能的表现来判断该类群微生物的存在和丰度。

MPN法广泛应用于测土壤、水体等环境中氨化、硝化、反硝化、纤维素分解、固氮、硫化和反硫化细菌等特殊微生物生理类群和藻类的数量,以及牛奶等食品中的特殊微生物类群(如大肠菌群)的数量,还可用于检测环境中某些基因工程菌株的数量。MPN法的缺点是只适于进行特殊生理类群的测定,结果也较粗放,而且工作量很大,只有在因某种原因不能使用平板计数时才采用。

下表是几种主要微生物生理群MPN计数法一览表:

微生物生理群培养基常用稀释度常用重复次数培养时间 (天)主要检查方法
微生物生理群培养基常用稀释度常用重复次数培养时间 (天)主要检查方法
氨化细菌蛋白胨氨化培养基10-6—10-947根据培养液加奈氏试剂后是否出现棕色或褐色,确定是否产生氨。
亚硝酸细菌铵盐培养基10-2—10-7314根据培养液加格利斯试剂Ⅰ及Ⅱ的反应,出现绛红色证明有NO-2生成;或在培养中加锌碘淀粉试剂及体积比值为20%的H2SO4,若出现蓝色,证明有NO-3生成。
硝酸细菌亚硝酸盐培养基10-2—10-6314根据培养液加入浓硫酸及二苯胺试剂后,是否出现蓝色,确定是否有NO-3生成。
反硝化细菌反硝化细菌培养基10-4—10-8314根据杜氏小管有无气体,确定有无N2生成;利用格利斯试剂Ⅰ及Ⅱ和二苯胺试剂、浓硫酸检测有无NO-2生成及有无NH3存在,判断反硝化作用进行情况。
好气性自生固氮菌阿须贝无氮培养基10-2—10-637-14根据培养液表面与滤纸接触处有无褐色或粘液状菌膜生成,判断有无好气性自生固氮菌生长。
好气性 纤维素分解菌赫奇逊噬纤维培养基10-1—10-5314根据各试管中滤纸条上有无黄色或桔黄色菌斑出现及滤纸断裂状况,确定有无好气性纤维素分解细菌的生长。
厌气性纤维素分解菌嫌气性纤维素分解细菌培养基10-1—10-5314-21根据各试管中滤纸条上有无穿洞、破裂、完全分解情况,确定有无嫌气性纤维素分解细菌的生长。
硫化细菌硫化细菌培养基10-2—10-8321-23在每管培养液中加入10g/L的BaCL2溶液2滴,如有白色沉淀出现,则证明有硫化菌活动。
反硫化细菌斯塔克反硫化细菌培养基10-2—10-7321-30根据培养液试管底部、管壁有无黑色沉淀出现,判断有无反硫化细菌活动。
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