金胺O-罗丹明B荧光染色法

摘 要:

试剂:罗丹明B液、0.1%金胺O液、3%盐酸酒精和稀释美蓝液。方法:将细菌涂片固定后加第1液30-90秒;弃去第1液,加第2液染15分钟;用第3液脱色1-2分钟,水洗;滴加第4液染30秒,水洗,待干;干后置荧光显微镜下镜检观察结果。在淡蓝色背景下,抗酸菌呈红色或金黄色荧光,其它细菌和细胞呈蓝色。

关键词:

一、试剂

1、罗丹明B液(第1液):罗丹明B 0.1g加蒸馏水100ml;

2、0.1%金胺O液(第2液):金胺O  0.1g加蒸馏水95ml,再加入纯石炭酸5ml,混匀;

3、3%盐酸酒精(第3液);

4、稀释美蓝液(第4液): 吕弗勒美蓝液10ml,加蒸馏水90ml,混匀。

二、方法

1、细菌涂片固定后加第1液30-90秒。

2、弃去第1液,加第2液染15分钟。

3、用第3液脱色1-2分钟,水洗。

4、滴加第4液染30秒,水洗,待干。

5、干后置荧光显微镜下镜检观察结果。

三、结果

在淡蓝色背景下,抗酸菌呈红色或金黄色荧光,其它细菌和细胞呈蓝色。

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