改良Hodge试验(modified Hodge test,MHT)方法和结果判定

摘 要:

肠杆菌科细菌在临床感染标本的分离率呈逐年上升的趋势,产碳青霉烯酶肠杆菌的检出,表明作为治疗多重耐药的肠杆菌科细菌的最后一道防线的碳青霉烯酶类抗生素也出现了耐药现象。改良Hodge试验(MHT)是临床检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型的常规方法。本文对MHT的试验方法和结果判定进行介绍。

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肠杆菌科细菌在临床感染标本的分离率呈现逐年攀升的趋势,产碳青霉烯酶肠杆菌的检出,表明作为治疗多重耐药的肠杆菌科细菌的最后一道防线的碳青霉烯酶类抗菌药物也出现了耐药情况,这无疑给多重耐药肠杆菌科细菌的治疗和感染管理提出了更高的挑战。为了更加有针对性地治疗和预防多重耐药肠杆菌科细菌,临床上对于多重耐药肠杆菌科细菌的耐药基因表型的初步检测显得尤为重要。改良Hodge试验(modified Hodge test,MHT)是美国临床实验室标准化协会(CLSI)在2009年推荐的检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型的常规方法。MHT法操作简便,不需要大型仪器,在一般检验科的临床微生物室都可以开展,因此被广泛用于产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的表型检测。

一、实验方法

1、以大肠杆菌ATCC 25922作为指示菌,用无菌生理盐水将大肠杆菌ATCC 25922菌悬液调至0.5麦氏浊度,再用生理盐水稀释10倍。

2、将稀释后的大肠杆菌ATCC 25922菌液均匀涂布于MH琼脂平板上,将平板干燥3-10分钟。

3、将美罗培南或亚胺培南或厄他培南药敏纸片(10ug/片)置于MH琼脂平板中心位置。

4、使用接种环挑取待测菌株或质控菌株,以平板中心的药敏纸片为起点,沿离心方向划线,长度为20-25mm。

5、将平板放置于35±2°C培养16-20h。

二、结果判定

1、质控菌株结果成立的情况。

2、改良Hodge试验结果阳性:在被测菌株线与大肠杆菌ATCC 25922抑菌圈交汇处,出现大肠杆菌生长增强现象,即改良Hodge试验结果阳性,受试菌株产碳青霉烯酶。

3、改良Hodge试验结果阴性:在被测菌株线与大肠杆菌ATCC 25922抑菌圈交汇处,未出现大肠杆菌生长增强现象,即改良Hodge试验结果阴性,受试菌株不产碳青霉烯酶。

注:某些受试菌株可能具有抑制大肠杆菌ATCC 25922菌生长的特性。若出现这种情况,在受试菌株划线两侧可见清晰的抑制生长区。不能根据改良Hodge试验结果对这类受试菌株是否产碳青霉烯酶作出判定。

结果判读图例:

改良Hodge试验(modified Hodge test,MHT)方法和结果判定

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