细菌生长状态(菌龄)和细胞浓度对冻干保藏存活率的影响

摘 要:

微生物生长时期及生长状态不同,对外界不良环境的抵抗力不同。冻干保藏不产芽孢的细菌、酵母菌等,应采用对数生长末期或稳定期初期的细胞。冻干保藏产芽孢的细菌、放线菌和霉菌等,要用成熟的孢子。此外,为了保证在复苏使用时有足够数量存活的细胞,冻干前通常要适度浓缩以加大细胞密度。

关键词:

冻干微生物的生长状态(菌龄)对其冷冻干燥保藏后细胞存活率有重要影响,例如鼠李糖乳杆菌在生长的稳定期进行冷冻干燥,细胞存活率为31%-50%,而在生长对数期为14%,在生长迟缓期仅为2%。

研究表明:微生物生长时期及生长状态不同,细胞的生理状态差异很大,对外界环境条件的反应程度不一。处于稳定期的细胞或成熟的孢子对不良环境的抵抗力较强,因此,冻干保藏不产芽孢的细菌、酵母菌等,应采用对数生长末期或稳定期初期的细胞。一般情况下,细菌要求24-48小时的培养物,酵母需培养3天。如冻干保藏产芽孢的细菌、放线菌和霉菌等,要用成熟的孢子,相应的时期为产芽孢细菌在细胞的分化阶段、放线菌在生长II期(放线菌与丝状真菌通常需培养7-10天),霉菌在无性孢子繁殖期和有性孢子繁殖期。

在冷冻干燥保藏技术中,为了保证在复苏使用时有足够数量存活的细胞,冻干前通常要适度浓缩以加大细胞密度,细菌和放线菌浓度一般在10E8-10E9 CFU/mL,酵母菌和霉菌孢子的浓度一般要大于10E7 CFU/mL。

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