超低分子量壳聚糖的制备方法

摘 要:

壳聚糖(Chitosan)的分子量是影响其分子特性的关键因素,也会影响壳聚糖纳米颗粒的稳定性和细胞转染效率。由于市售的绝大多数壳聚糖的平均分子量都远高于50-70 kDa,因此很少有研究利用低分子量(小于50 kDa)壳聚糖用于药物递送的可行性。Janes等建立了制备超低分子量(平均分子量为10-40 kDa)壳聚糖的方法。

关键词:

大量研究表明,壳聚糖(Chitosan)的分子量是影响其分子特性的关键因素。Schipper等报道壳聚糖的分子量会影响其对Caco-2细胞膜的渗透性。低脱乙酰度(小于65 %)高分子量(大于100 kDa)的壳聚糖能增加细胞膜的通透性。Henriksen等报道低分子量(45 kDa)壳聚糖能促进眼部粘膜粘附。还有研究发现,用不同分子量壳聚糖制备的微球对犬口服后,低分子量(25 kDa)壳聚糖微球的生物利用度最高。

有研究表明,壳聚糖的分子量会影响壳聚糖纳米颗粒的稳定性和细胞转染效率。由于市售的绝大多数壳聚糖的平均分子量都远高于50-70 kDa,因此很少有研究利用低分子量(小于50 kDa)壳聚糖用于药物递送的可行性。Janes等建立了制备超低分子量(平均分子量为10-40 kDa)壳聚糖的方法。

1、壳聚糖L210 (CS-L210,平均分子量为150-170 kDa,脱乙酰度为82%) 购自Pronova Biopolymer公司。

2、将壳聚糖溶解在1% (v/v)的乙酸溶液或去离子水中,配制成0.2% (w/v)的壳聚糖溶液,溶液过滤去除杂质。

3、利用亚硝酸钠(NaNO2)的降解作用制备超低分子量壳聚糖,在室温磁力搅拌状态下,将0.2%浓度(w/v)的NaNO2溶液加入0.2%浓度(w/v)的壳聚糖乙酸溶液(比例为1:15),反应持续1h。解聚后壳聚糖的分子量可以按参考文献的方法进行测量和计算。

4、用亚硝酸纳对壳聚糖解聚后,不需要进行纯化,即可用解聚后的壳聚糖制备纳米颗粒。

参考文献:

[1] Janes K and Alonso MJ. Depolymerized chitosan nanoparticles for protein delivery: preparation and characterization. J. App. Polym. Sci. 2003,88(12):2769-2776.

[2] Rampino A, et al. Chitosan nanoparticles: preparation, size evolution and stability. Int J Pharm 2013,455(1-2): 219-228.

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