阳离子脂质体(cationic liposome)的制备材料与制备方法

摘 要:

阳离子脂质体(Cationic Liposomes)与带负电荷的抗原递呈细胞(APC细胞)更易于相互作用,正电荷脂质体更容易被APC细胞摄取,从而使阳离子脂质体诱导出比中性或阴性脂质体诱导出更强的特异性免疫反应。下面简要介绍阳离子脂质体制备所需的材料及制备方法。

关键词:

阳离子脂质体(Cationic Liposomes)与带负电荷的抗原递呈细胞(APC细胞)更易于相互作用,正电荷脂质体更容易被APC细胞摄取,从而使阳离子脂质体诱导出比中性或阴性脂质体诱导出更强的特异性免疫反应。下面简要介绍阳离子脂质体制备所需的材料及制备方法。

一、制备所需材料

1、存于氯仿中的DOTAP(890890C)和DSPE-PEG(2000)-maleimide (880126)购自Avanti Polar Lipids公司;

2、2,4,6-trinitrobenzene-1-sulfonic acid (TNBS) (P2297)、N-(3-dimethylaminopropyl)-N’-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDC) (E6383)、2-iminothiolane hydrochloride (Traut’s reagent) (I6256)、Rhodamine B isothiocyanate (83689)和fluorescein isothiocyanate-dextran (F7250) 均购自Sigma-Aldrich公司。

3、Rac-trans3’-hydroxymethylnicotine hemisuccinate (H948190) 购自Toronto Research Chemicals公司;

4、The micro BCA assay kit (23235) 购自Thermo Scientific公司。

二、阳离子脂质体制备方法[1]

阳离子脂质体是按照参考文献[2]描述的方法制备。简言之,脂质膜(lipid film)由1.96 mg DOTAP和0.04-0.32 mg不等的DSPE-PEG(2000)-maleimide在缓冲液(含有0.9% NaCl、5% dextrose和10% sucrose的Tris-HCl缓冲液(0.05 M Tris碱,pH7.4))中水合而成,将悬液在65°C孵育1h,通过100nm孔径的聚碳酸酯膜(polycarbonate membrane)挤压过滤,重复14次。

参考文献:

[1] Hu Y, et al. A novel and efficient nicotine vaccine using nano-lipoplex as a delivery vehicle. Hum Vaccin Immunother 2014,10(1): 64-72.

[2] Huang W, et al. Assembly of single-walled carbon nanohorn supported liposome particles. Bioconjug Chem 2011,22(6): 1012-1016.

    A+

除注明外,本站内容由 细菌之家 原创或整理,转载请注明出处及链接。

本文永久链接: http://www.bacteria.cn/html/2014/752.html

  • 请您留言:专业水平所限,谬误之处在所难免。如您发现不正之处,请在下面留言,谢谢!

发表评论

:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen:

图片 表情