根据OD260/OD280比值判断DNA纯度

OD是optical density(光密度)的缩写。吸光度(absorbance)是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的对数,影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等。吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关。只要光的波长被固定下来,同一种物质,吸光系数就不变。 当一束光通过一个吸光物质(通常为溶液)时,溶质吸收了光能,光的强度减弱。吸光度就是用来衡量光被吸收程度的一个物理量。吸光度用A表示。

一般来说OD260代表核酸的吸光度,OD280代表蛋白质的吸光度。 A260/A280与OD260/OD280的意思是一样的。A代表吸光值,而OD是光密度值,一个意思。

核酸的纯度可以根据OD260/OD280的比值进行判断,纯度高的DNA其OD260/OD280在1.8~2.0之间,低于此范围表明蛋白质含量超标,高于此范围表明样品中含有RNA。

理论上,纯的RNA情况下:OD260/OD280的值为2,纯的DNA情况下:OD260/OD280的值为1.8。样品中如果含有蛋白质及苯酚,OD260/OD280比值会明显下降。对于纯的样品,只要读出260 nm 的A值即可以算出含量。

OD260/OD280=1.9~2.0 RNA居多,纯度已经很高了。

纯DNA:OD260/OD280≈1.8(>1.9,表明有RNA污染;<1.6,表明有蛋白质、酚等污染)

纯RNA:1.7 <OD260/OD280<2.0(<1.7时表明有蛋白质或酚污染;>2.0时表明可能有异硫氰酸残存)。

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