枯草芽孢杆菌超级感受态SCK6

摘 要:

枯草芽孢杆菌的转化效率比大肠杆菌低得多。通过对枯草芽孢杆菌进行改造,利用木糖诱导启动子PxylA控制感受态调控基因comk的表达。制备感受态时,在细菌生长对数期添加1%浓度的木糖(xylose)诱导comk基因的超表达2h,从而制备出枯草芽孢杆菌超级感受态SCK6细胞。

关键词: , ,

大肠杆菌是分子生物学研究中最常用的工程菌,但在一些特殊情况下,利用大肠杆菌也有其局限性,因而实验人员也常利用枯草芽孢杆菌进行实验。

与大肠杆菌不同,枯草芽孢杆菌的转化效率低得多,很多情况下都难以获得转化子,尤其是在建立文库时很困难。2011年张晓舟等发表文章(参考文献:Xiao-Zhou Zhang, Y.-H. Percival Zhang. Simple, fast and high-efficiency transformation system for directed evolution of cellulase in Bacillus subtilis. Microbial Biotechnology, 2011,4(1):98–105),对枯草芽孢杆菌1A751进行改造,利用木糖诱导启动子PxylA控制感受态调控基因comk的表达。制备感受态时,在细菌生长对数期添加1%浓度的木糖(xylose)诱导comk基因的超表达2h,从而制备出枯草芽孢杆菌超级感受态SCK6细胞。该方法简单、快速(1天时间)、高效(每μg多聚体质粒或连接产物的转化子分别为10^7或10^4)。

    A+

除注明外,本站内容由 细菌之家 原创或整理,转载请注明出处及链接。

本文永久链接: http://www.bacteria.cn/html/2014/23.html

  • 请您留言:专业水平所限,谬误之处在所难免。如您发现不正之处,请在下面留言,谢谢!

发表评论

:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen:

图片 表情