RNA琼脂糖凝胶电泳方法(Protocol)

由于RNA和DNA的结构和性质不同,因此RNA琼脂糖凝胶电泳方法也与DNA有所不同。如RNA分子有很多二级结构,需经变性剂处理,进行变性电泳,而DNA一般不需要变性处理;RNA电泳的电泳槽及缓冲液均需要确保无RNAase污染,实验器材和试剂最好预先用RNAase抑制剂处理,而DNA则无需预先进行处理。

 RNA琼脂糖凝胶电泳方法(Protocol):

1、 1%的琼脂糖凝胶电泳凝胶的配制:

1) 称取琼脂糖0.45 g放入三角瓶中,向其中加入4.5 ml的10×MOPS缓冲液和39.5 ml的DEPC水,放微波炉里溶化。

2) 待冷却到60℃左右时,加入1 ml甲醛,摇匀(避免产生气泡)。倒入凝胶板上凝固30 min。

2、取RNA样品各5 μl,加入6×RNA电泳上样缓冲液1 μl混匀,加入变性胶加样孔中。

3、120V电压下电泳25 min。用凝胶紫外分析仪观察,照相保存。

4、RNA电泳结果可见28S和18S两条明亮条带,无DNA条带污染。

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