腹腔注射免疫小鼠的方法及抗原剂量

在利用昆明鼠或BALB/c鼠进行免疫的时候,不论是用来制备单克隆抗体还是检测目的蛋白的抗原性都可以使用与制备单抗相同的免疫方案。最常用的多肽或蛋白类抗原腹腔免疫小鼠的方式和免疫剂量

1、首次免疫用50ug抗原(可溶性的)溶解于100或150ul的生理盐水或是PBS,加入等量的弗氏完全佐剂充分乳化后进行小鼠腹腔注射,注射体积不超过0.5ml/只小鼠。

2、两周后,用同样的剂量和同样的抗原进行腹腔免疫,通常情况下这次免疫佐剂为弗氏不完全佐剂,但也有用弗氏完全佐剂。

3、三周后用50ug抗原溶解于100或150ul的生理盐水或是PBS,加入等量的弗氏不完全佐剂充分乳化后腹腔注射。

4、两周后50-80ug的抗原加入生理盐水到200ul行腹腔注射,三天后尾静脉取血测效价确定下一步实验方案。

抗原与佐剂的乳化

抗原乳化前,应检查抗原管有否颗粒状沉淀,如有沉淀,应超声粉碎后再用。用2-5ml注射器,取含抗原的溶液,另一支注射器取(等体积)福氏完全佐剂或不完全佐剂,用不锈钢连接接头连接,反复推拉混合约10-30分钟,平放静置30分钟,如水乳相不再分离,即乳化完全,可注射小鼠。

    A+

除注明外,本站内容由 细菌之家 原创或整理,转载请注明出处及链接。

本文永久链接: http://www.bacteria.cn/html/2014/143.html

  • 请您留言:专业水平所限,谬误之处在所难免。如您发现不正之处,请在下面留言,谢谢!

发表评论

:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen:

图片 表情