小鼠粪便及肠道的分泌性IgA(sIgA)采集方法

摘 要:

分泌性IgA(sIgA)是肠道免疫屏障的重要组成部分,sIgA通过抑制细菌或病毒粘附在肠上皮表面,阻止细菌穿入肠道屏障,因此肠道sIgA的检测是免疫学研究中常见的实验内容之一。目前市场上有各种商品化的小鼠sIgA的ELISA检测试剂盒,但小鼠肠道内sIgA的收集还需要实验人员自己进行。

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分泌性IgA(sIgA)是肠道免疫屏障的重要组成部分,sIgA通过抑制细菌病毒粘附在肠上皮表面,阻止细菌穿入肠道屏障,因此肠道sIgA的检测是免疫学研究中常见的实验内容之一。

目前市场上有各种商品化的小鼠sIgA的ELISA检测试剂盒,但小鼠肠道内sIgA的收集还需要实验人员自己进行。以下介绍一种常用的小鼠粪便中sIgA采集方法:

1、小鼠粪便sIgA的采集:取免疫前和免疫后小鼠的新鲜粪便,以4 mL/g加0.01M PBS、0.05M EDTA缓冲液悬浮,冰上震荡15min,4 ℃ 10000g离心5 min,上清液-20 ℃冻存待检测用;

2、小鼠肠道sIgA的采集:取免疫前和免疫后小鼠,取小肠3cm,剪碎后加400 μL 0.01 M PBS、 0.05M EDTA悬浮,冰上震荡10min,4 ℃ 10000g离心5min,上清液-20 ℃冻存待检测用。

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